| 陈茜,周青,汪迎晖,王潇,郭瑞强.携抗ICAM-1抗体SonoVue微泡造影剂靶向识别受损内皮的实验研究[J].中国医学影像技术,2010,26(s1):119 |
| 携抗ICAM-1抗体SonoVue微泡造影剂靶向识别受损内皮的实验研究 |
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| 目的 探讨携抗ICAM-1抗体的靶向微泡的制备方法及靶向微泡在体内和体外的寻靶作用。方法 选用标记了FITC的抗ICAM-1作为一抗。SonoVue微泡造影剂与稀释后的抗ICAM-1抗体以2∶1的体积混合,分别调整反应液pH 值至4.0~5.0或8.0~9.0,静置分层,取上浮泡沫,重悬于PBS缓冲液中制成携抗ICAM-1的超声微泡造影剂。将微泡混悬液置于荧光显微镜下观察。将人血管内皮细胞株(ECV304)经100U/mlIL-1β刺激使ICAM-1大量表达。将200μl携抗ICAM-1抗体微泡与刺激后或未经刺激的ECV304细胞混合,荧光显微镜下观察细胞与微泡的结合情况。结扎冠状动脉左旋支建立兔心肌梗死模型。将1ml携抗ICAM-1抗体的微泡或FITC标记的微泡经耳缘静脉注入,造影后取材,将梗死区心肌组织制成冰冻切片,显微镜下观察内膜层微泡数量及荧光现象。结果 在pH 值为4.0~5.0的酸性条件下,抗ICAM-1抗体可与SonoVue微泡结合,光镜下可见结合了抗ICAM-1抗体的微泡部分聚集,荧光显微镜下可见微泡外周发出绿色荧光。流式细胞检测示在pH 值为4.0~5.0的酸性条件下抗体与微泡的结合率为(52.3±5.3)%,而在pH 值为8.0~9.0的碱性条件下抗体与微泡的结合率仅为(2.7±0.8)%。携抗ICAM-1抗体的靶向微泡可在体外黏附于经IL-1β刺激的ECV304细胞表面。荧光显微镜下观察兔梗死心肌组织的冰冻切片,于受损血管内膜层可见明亮荧光。结论 携抗ICAM-1抗体的微泡能够在受损内皮处高浓度滞留,有利于超声造影的观察,且为微泡携带的药物或基因在局部定向释放开辟了新的思路。 |
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