胡秋菊,王建东,张帆,赵艳娥,董迎春,盛蓁,周晓军,卢光明.新型内源性磁共振报告基因——小鼠铁蛋白基因的构建[J].中国医学影像技术,2009,25(8):1355~1357
新型内源性磁共振报告基因——小鼠铁蛋白基因的构建
Construction of a new endogenous MRI reporter gene of mice—the plasmid of ferritin H-chain gene
投稿时间:2009-01-07  修订日期:2009-03-01
DOI:
中文关键词:  铁蛋白  重链  分子影像  报告基因
英文关键词:Ferritin  Heavy chain  Molecular imaging  Reporter gene
基金项目:国家基础研究973基金(2006CB705707)。
作者单位E-mail
胡秋菊 南京军区南京总医院医学影像科 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002  
王建东 南京军区南京总医院病理科, 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002  
张帆 南京军区南京总医院医学影像科 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002  
赵艳娥 南京军区南京总医院医学影像科 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002  
董迎春 南京军区南京总医院病理科, 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002  
盛蓁 南京军区南京总医院病理科, 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002  
周晓军 南京军区南京总医院病理科, 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002  
卢光明 南京军区南京总医院医学影像科 南方医科大学临床医学院,江苏 南京 210002 cjr.luguangming@vip163.com 
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中文摘要:
       目的 应用pcDNA3.1(-)质粒载体系统构建携带小鼠铁蛋白重链全基因质粒,并探讨铁蛋白基因作为一种新型内源性磁共振分子影像报告基因的可行性和优越性。方法 从来源于小鼠肌肉的mRNA,应用一对含有限制性内切酶NotⅠ和BamHⅠ酶切位点的引物进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),扩增出铁蛋白重链全基因(Fth)片断。通过限制性内切酶NotⅠ和BamHⅠ酶切和T4连接酶的作用,将铁蛋白重链全基因插入到载体pcDNA3.1(-)中,构建铁蛋白重链全基因质粒pcDNA3.1(-)-Fth。结果 质粒pcDNA3.1(-)-Fth成功构建,符合酶切和测序鉴定结果。结论 初步构建的小鼠铁蛋白重链质粒,为进一步探讨铁蛋白基因作为一种新型内源性磁共振分子影像报告基因在细胞示综和基因显像中的应用奠定了基础。
英文摘要:
      Objective To construct the plasmid of heavy chain of mice ferritin, and to research its possibility and superiority of being a new endogenous MRI reporter-ferritin. Methods The fragment of heavy chain of ferritin (Fth) was amplified from murine muscle mRNA using RT-PCR with a set of primers containing digestive sequences of restriction enzyme NotⅠ and BamHⅠ. The Fth fragment was inserted into pcDNA3.1 vector after digested with Not Ⅰ and BamH Ⅰ, and ligated with T4 ligase. Results The constructed plasmid was checked by digestion with restrictive enzymes and DNA sequencing. Conclusion The plasmid of heavy chain of murine can be successfully constructed.
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