| 马强,吴镝,孙雪峰,陈俊香,张东山,丁瑞,谢院生,陈香美.超声微泡介导大鼠肾脏β-半乳糖苷酶基因转导[J].中国医学影像技术,2009,25(4):547~550 |
| 超声微泡介导大鼠肾脏β-半乳糖苷酶基因转导 |
| Efficient gene delivery to rat kidney with ultrasound and microbubble |
| 投稿时间：2008-04-10 修订日期：2009-01-08 |
| DOI： |
| 中文关键词: 基因治疗 肾脏 超声 微泡 |
| 英文关键词:Gene therapy Kidney Ultrasound Microbubble |
| 基金项目:国家自然科学基金面上课题(30670983)。 |
| 作者 | 单位 | E-mail | | 马强 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853 | | | 吴镝 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853 | | | 孙雪峰 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853 | | | 陈俊香 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853
中南大学湘雅二医院肾内科,中南大学肾病研究所,湖南 长沙 410011 | | | 张东山 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853
中南大学湘雅二医院肾内科,中南大学肾病研究所,湖南 长沙 410011 | | | 丁瑞 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853 | | | 谢院生 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853 | | | 陈香美 | 解放军总医院肾科,解放军肾病中心暨重点实验室,北京 100853 | xmchen301@126.com |
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| 中文摘要: |
| 目的 应用超声微泡介导β-半乳糖苷酶基因转导大鼠肾脏,探讨超声微泡介导肾脏基因转导的效率和可行性。方法 Wistar大鼠40只,分为超声微泡质粒组、微泡质粒组、超声质粒组、裸质粒组、超声微泡组和超声PBS组。超声微泡质粒组经肾动脉注射微泡和质粒混合物,并以0.3 W/cm2超声辐照肾脏,转导后3 min、12 h、3 d、7 d取肾和肝、脾等肾外器官;超声质粒组、超声微泡组和超声PBS组给予肾动脉注射质粒、微泡和PBS后超声辐照肾脏,微泡质粒组和裸质粒组仅给予肾动脉注射微泡和质粒混合物,不予超声暴露,转导后12 h取材。冰冻切片行X-gal染色观察肾脏和肾外器官β-半乳糖苷酶基因表达,Megalin免疫组化复染观察转导基因的肾组织定位;PAS染色观察肾组织病理变化;生化检测血AST、ALT、BUN和Cr水平。结果 超声微泡介导质粒转导12 h后大鼠肾组织可见较大量β-半乳糖苷酶基因表达,集中在肾小管,靠近皮质较多,肾小球和肾间质无表达,至7 d时肾小管仍有表达,Megalin免疫组化复染显示β-半乳糖苷酶基因主要在近端小管表达。超声质粒组大鼠肾脏有极微量基因表达,其他四组均无基因表达。各实验组大鼠肝、脾等肾外器官均无基因表达,肾脏PAS染色和血清学检查均无明显病理学变化。结论 超声微泡可有效促进大鼠肾脏基因转导,是一种较为安全有效的基因转导方法。 |
| 英文摘要: |
| Objective To test the hypothesis that ultrasound destructed microbubbles can transduce β-galactosidase gene target into rat kidney. Methods Optison microbubbles and Lacz plasmids mixture were injected into Wistar rat kidneys via left renal arteries, then the rat kidneys were exposed to ultrasound for 3 min, 12 h, 3 d and 7 d after gene transfer, and the efficiency of gene expression was evaluated on the basis of the β-galactosidase expression in kidney, liver and spleen. PAS-stained kidney section and biochemical for AST, ALT, BUN and CR were performed to examine the side effects of this method. Results β-galactosidase expression could be observed in tubules but not in glomeruli nor interstitial area, positive expression in tubules lasted for 7 d in ultrasound destroyed microbubble group; megalin immunostaining was detected in the same proximal tubule. There was no evident pathological and biochemical change after gene transfer. Conclusion Ultrasound destructed microbubbles can increase gene transferred into rat kidney. This non-invasive gene transfer method may be a useful tool for clinical gene therapy. |
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